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蛋白手性柱

简要描述:蛋白手性柱:蛋白质型手性色谱柱属于第5种类型。分离依赖于疏水相互作用和极性相互作用。已经有多种蛋白质用于此类手性色谱柱。目前使用较多的是α-酸性糖蛋白(α-Acid Glycoprotein,AGP),人血清白蛋白(Human Serum Albumin,HSA),牛血清白蛋白(Bovine Serum Albumin,BSA)和卵类粘蛋白(Ovomucoid,OV)。

  • 产品型号:
  • 厂商性质:生产厂家
  • 更新时间:2023-12-11
  • 访  问  量:2110

详细介绍

 

蛋白手性柱

 
  α-酸性糖蛋白分子由181个氨基酸残基和40个唾液酸(sialic acid)残基构成。α-酸性糖蛋白分子偏酸性,等电点为2.7。含有两个二硫键,性质很稳定。α-酸性糖蛋白分子可以共价键合到硅胶上,制成手性色谱柱,可以分离许多化合物。
  α-酸性糖蛋白手性色谱柱使用的流动相通常为pH 4-7的磷酸盐缓冲液和很小比例的有机相。有机相*异丙醇,如达不到分离要求,可以尝试乙腈,乙醇,甲醇或四氢呋喃。有机相的改变导致蛋白结构发生暂时的改变。色谱柱的负载量至关重要,典型的负载量为0.02mg/ml的浓度样品,进样20μl。pH 的改变对手性选择性起关键作用,尤其是胺类化合物。pH降低导致蛋白质负电荷的降低,引起胺类化合物保留时间减小,然而这意味着可以减小有机相比例,使选择性增加,峰形改善。
  通过调节有机相比例仍无法达到分离效果时,有时需用电荷调节剂。但这可能引起蛋白结构的*改变,这些电荷调节剂包括丁酸、辛酸、癸酸和二甲基辛胺。有时也用到1,2 亚乙基二醇,1,2丁醇和氯化钠。温度对分离也有影响,温度增加保留时间,减小分离因子。
  人血清白蛋白(HSA)分子量为69,000,等电点为4.8。蛋白中认为存在两个药物结合位点:华法令-氮杂普鲁帕宗(warfarin-azapropazone)和苯基二氮杂-吲哚(benzodiazapine-indole)结合位点。流动相中加入辛酸,采用人血清白蛋白手性色谱柱可以有效分离benzodiazapine。Warfarin 和oxazepam也用人血清白蛋白手性色谱柱得到了分离,流动相组成为:100mM磷酸缓冲液pH7:乙腈:异丙醇 = 84:10:6。
  牛血清白蛋白(BSA)为球型蛋白,分子量为66,000,等电点为4.7。此蛋白为一个单氨基酸链,通过17个二硫键形成9个双环。许多化合物通过牛血清白蛋白手性色谱柱得到分离。牛血清白蛋白不如α-酸性糖蛋白稳定,一些有机溶剂(如乙腈、甲醇)可使蛋白变性,因此使用起来要特别注意。
  卵类粘蛋白由蛋清中提取,分子量为55,000。它可分离大量的胺类和酸类化合物。
  蛋白手性色谱柱的载样量均较小。影响了蛋白手性色谱柱在制备色谱中的应用。
  蛋白手性色谱柱在所有手性色谱柱中是应用zui广的色谱柱,但并不是效果的色谱柱。

蛋白质键合手性柱描述产品描述

规格

货号

Reprosil Chiral-AGP(α1-酸性糖蛋白手性柱),

粒径5μm,USP L41填料,反相系统

 

 

 

 

 

具有zui广泛的适用范围:

1:胺类化合物(一级胺,二级胺,三级胺,四级胺类化合物)

2:酸性化合物(强酸性化合物,弱酸性化合物)

3:非质子类化合物(酰胺类化合物,酯类化合物,醇类化合物,亚砜类化合物等)

4;例如缬沙坦原料检测

 

150 x 4mm

r35.agp.s1504

100 x 4mm

r35.agp.s1004

150x3mm

r35.agp.s1503

100 x 3mm

r35.agp.s1003

50 x3 mm

r35.agp.s0503

Guards(5 x 3 mm, 2 pieces

r35.agp.v0003

Guard holder(direct )

PN:81.00

150x2mm

r35.agp.s1502

100 x 2mm

r35.agp.s1002

50 x2 mm

r35.agp.s0502

Guards(5 x 2 mm, 2 pieces)

r35.agp.v0002

Guard holder(direct )

PN:91.00

Reprosil Chiral-HSA人体血清白),粒径5μmUSP L79填料,反相系统

 

硅胶表面共价键合有人体血清白蛋白适用于反相系统。

适用分离的化合物:强酸、弱酸、两性离子和非质子类化合物

150x2mm

r35.hsa.s1502

100 x 2mm

r35.hsa.s1002

50 x2 mm

r35.hsa.s0502

Guards(5 x 2 mm, 2 pieces)

r35.hsa.v0002

Guard holder(direct )

PN:91.00

 

 

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