凝胶色谱柱是凝胶渗透色谱(GPC)系统的核心部件，其性能会随使用时间逐渐衰减。当出现以下关键信号时，就需要警惕并考虑更换色谱柱了。一、柱压异常升高或波动柱压是判断色谱柱状态的首要指标。新柱使用时需记录相同流速和流动相条件下的初始柱压，若柱压较初始值升高50%以上，且通过反向冲洗、更换在线滤片等维护手段仍无法恢复，说明柱内填料可能因污染或堵塞导致压力异常。对于5μm粒径、4.6×250mm规格的色谱柱，当柱前压超过2900psi(20MPa)时，需要特别警惕，超过60%的色谱柱...

制备柱作为色谱纯化的核心设备，其性能直接决定分离效率与产品纯度。然而，80%的实验室因维护不当导致柱效衰减、交叉污染，甚至引发实验失败。本指南提供实操性步骤，助您科学延长制备柱寿命，避免冗余成本。一、首要步骤：每次使用后，立即执行梯度冲洗：先用高比例水相(如90%水/10%甲醇)清洗5柱体积，再用有机溶剂(如乙腈)平衡。避免使用强酸强碱(如HCl)，以防填料腐蚀。例如，蛋白质纯化后，必须用0.1MNaOH冲洗10柱体积，再用缓冲液恢复至pH7.0。若跳过此步，残留蛋白会吸附在...

亲和层析空柱是生物大分子(如重组蛋白、抗体)纯化中的核心工具，尤其适用于His-tag、GST或ProteinA/G等特异性结合体系。与预装柱相比，空柱具有成本低、灵活性高、可定制填料等优势，但其性能高度依赖规范的操作流程。以下是标准化使用全流程详解。一、亲和层析空柱准备与检查使用前需确认空柱无裂纹、接口密封良好，内壁光滑无残留。用去离子水或20%乙醇冲洗柱体，排除颗粒杂质，并确保筛板孔径(通常为20–50μm)与所选填料匹配，防止填料泄漏。二、填料装填(关键步骤)浆料制备：...

多肽色谱柱是生物制药与科研中的关键耗材，价格昂贵且直接影响分离效果。通过科学的维护、清洗与再生，可显著延长其使用寿命，降低实验成本。以下是一套系统的维护方案。日常维护是基础。每次使用后，需用高比例有机相充分冲洗色谱柱30-60分钟，以洗脱强保留的多肽杂质。流动相需经0.22μm滤膜过滤并脱气，样品必须离心并过滤，以防止颗粒物堵塞筛板。操作时应避免压力骤升骤降，使用保护柱能有效拦截杂质，为核心柱体提供第一道防线。当柱压持续升高或峰形拖尾时，表明需要清洗。清洗需针对杂质性质选择策...

蛋白纯化预装柱作为现代生物实验室和生物制药生产中关键的工具，其性能稳定性直接关系到目标蛋白的回收率、纯度及实验重复性。为确保其长期有效使用，科学合理的储存条件与严格的保质期管理至关重要。首先，不同类型的预装柱对储存环境有特定要求。常见的亲和层析柱(如Ni-NTA、ProteinA/G)、离子交换柱和凝胶过滤柱，通常需在2–8℃冷藏保存，避免冷冻。低温可抑制微生物生长并减缓配基(ligand)降解，但冷冻会导致填料基质破裂或柱床塌陷，严重影响流速与分离效果。部分含特殊稳定剂的预...

低压层析柱作为实验室规模生物分子(如蛋白质、多糖、核酸)分离纯化的常用工具，其分离性能高度依赖于层析介质的装填质量。装填技术不仅直接影响柱效(以理论塔板数N或HETP衡量)，还决定了批次间实验的重现性，是层析工艺开发中不可忽视的关键环节。理想的装填应实现介质颗粒均匀、紧密且无气泡、无裂缝的柱床结构。若装填不均，将导致流路短路、沟流或死体积增加，造成峰形拖尾、分辨率下降，甚至目标组分损失。在低压系统中(通常操作压力常见的装填方法包括湿法沉降装柱和匀浆装柱。湿法装柱操作简单，但易...

亲和层析空柱是生物分离纯化领域的核心工具，通过特异性配体与目标分子的结合实现高效纯化。其操作规范性与安全性直接影响实验结果的可重复性与人员安全，以下从安装、装填、使用到维护全流程解析操作规范与关键注意事项。一、操作前准备：1.环境要求：操作需在清洁、干燥的实验台中进行，避免粉尘、有机物污染空柱内壁或填料。2.物料检查：确认空柱无裂痕、接口螺纹完好，配套筛板、填料及缓冲液符合实验设计要求。3.个人防护：佩戴手套、护目镜及实验服，若涉及毒性或传染性样品，需额外穿戴防护面罩与防溅围...