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延长多肽色谱柱使用寿命的维护、清洗与再生方法

更新时间:2025-12-16      点击次数:12
  多肽色谱柱是生物制药与科研中的关键耗材,价格昂贵且直接影响分离效果。通过科学的维护、清洗与再生,可显著延长其使用寿命,降低实验成本。以下是一套系统的维护方案。
 
  日常维护是基础。每次使用后,需用高比例有机相充分冲洗色谱柱30-60分钟,以洗脱强保留的多肽杂质。流动相需经0.22μm滤膜过滤并脱气,样品必须离心并过滤,以防止颗粒物堵塞筛板。操作时应避免压力骤升骤降,使用保护柱能有效拦截杂质,为核心柱体提供第一道防线。
 
  当柱压持续升高或峰形拖尾时,表明需要清洗。清洗需针对杂质性质选择策略:对于脂溶性残留,可用甲醇、异丙醇等有机溶剂反向冲洗;对于强吸附性多肽或蛋白质沉淀,可尝试温和的碱性溶液(如0.1%氨水)或酸性溶液(如0.1%磷酸)。清洗时流速宜缓(0.2-0.5 mL/min),时间约1-2小时,并需用过渡梯度切换溶剂,避免直接冲击柱床。
 
  当常规清洗无效,柱效显著下降时,需考虑再生。再生旨在剥离深层顽固杂质。可采用梯度递增的有机溶剂(如乙腈从50%逐步升至100%)进行长时间(数小时)冲洗。对于反相C18柱,有时会使用含低浓度离子对试剂的溶剂体系。若怀疑有微生物污染,可用20%-30%的异丙醇冲洗。再生后用存储溶剂平衡,并测试柱效是否恢复。

 


 
  长期存储也至关重要。色谱柱应全部冲洗后,保存在高比例有机相中(如80%乙腈),两端紧密密封,避免干涸。存放于4℃冰箱可进一步减缓填料降解。
 
  总之,延长多肽色谱柱寿命的关键在于“预防为主,及时干预”。建立规范的使用日志,记录压力、柱效变化,能帮助预判问题。通过上述分层级的精细维护策略,可将色谱柱使用寿命提升50%甚至更长,在保障数据质量的同时,实现可观的成本节约。

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