层析柱是凝胶层析技术中的主体,一般用玻璃管或有机玻璃管。层析柱的直径大小不影响分离度,样品用量大,可加大柱的直径,一般制备用凝胶柱,直径大于2厘米,但在加样时应将样品均匀分布于凝胶柱床面上。此外, 直径加大,洗脱液体体积增大,样品稀释度大。常见的有玻璃层析柱和加压层析柱。
玻璃层析柱,开口大,加料快,不需要其他仪器的配合,上方可以做成标准口与其他的标口玻璃仪器相接,但有不容易测量,筛网下方容易残留很多液体,层析速度较慢,不准确的特点,一般用于对精度要求没有那么高的实验,
加压层析柱,两端一般使用4F材料,耐腐蚀,酸碱性的耐度也可以,中段有玻璃材料的,也有有机玻璃材料的,需要与蠕动泵相结合,加快层析速度,用泵将料打进,如果没有泵则使用比较麻烦。现在一般的实验室都是使用加压的层析柱,淘宝上有卖的。
层析柱和色谱柱没有区别,有颜色的谱带叫作色谱,确切的应叫层析柱,因为现在色带是没有颜色的,但都习惯叫色谱柱。
层析柱和色谱柱真真要说区别那还是有一点区别,那就是色谱柱只是用在色谱仪中,层析柱不一定是用在色谱仪中,比如:用溶剂洗脱的柱层析所用的层析柱就不叫色谱柱。
层析柱与液相柱的区别:
1、压力
液相色谱柱(尤其是分析性液相色谱):压力较高,一般为10-20Mpa
层析柱:一般为常压,或使用真空泵(0.1Mpa左右)
2、填料
液相色谱柱:粒径较小(常规5-20um)
层析柱:粒径较大
3、分离度
由第二项决定,粒径越小,单位长度下理论塔板数越高
液相色谱柱:分离度比层析柱好
4、效率
液相色谱柱:分离速度快,一般在一小时内
层析柱:分离时间长,一小时以上
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