凝胶色谱柱作为高分子分离、分子量测定的核心部件，新手操作时若忽视细节，易导致柱效下降、数据偏差甚至柱体损坏。以下梳理5个高频误区及实用规避方案，助力新手规范操作。
误区一：样品前处理省略过滤/离心
新手常直接进样未处理的样品，若样品含颗粒杂质或未全部溶解的固体，会堵塞色谱柱筛板与孔隙，导致柱压骤升、峰形拖尾。
规避建议：液体样品需经0.22μm滤膜过滤(根据样品性质选有机相或水相滤膜)，黏稠或含悬浮颗粒的样品先离心(8000r/min，5分钟)，取上清液再过滤，确保样品无固体杂质。
误区二：流速骤升骤降
为追求实验速度，新手可能突然调高流速(如从0.5mL/min直接升至1.5mL/min)，或实验结束后瞬间降为0，这会冲击柱内固定相，导致柱床塌陷、分离效率下降。
规避建议：流速调整需循序渐进，每次变动幅度不超过0.2mL/min，等待柱压稳定后再继续调整；实验结束后，先将流速降至0.1-0.2mL/min，维持5分钟，再关闭泵体。
误区三：平衡时间不足急于进样
新手常看到基线“看似平稳”就急于进样，实则流动相与柱内残留溶剂未充分平衡，易出现基线漂移、峰面积重复性差的问题。
规避建议：更换流动相后，需根据柱长平衡(150mm柱平衡30分钟，300mm柱平衡60分钟以上)，观察基线波动范围(应≤0.1mV/h)，同时进样空白溶剂验证，确认无干扰峰后再正式进样。
误区四：实验后未及时清洗柱体
新手可能实验结束后直接关机，未清洗柱内残留样品(尤其是含强吸附性组分的样品)，长期积累会导致固定相污染、柱效不可逆下降。
规避建议：实验后用兼容流动相冲洗(如分析蛋白质样品后，用5%甲醇水溶液冲洗30分钟；分析有机溶剂样品后，用纯甲醇冲洗20分钟)，较后用保存溶剂(如80%甲醇水)冲洗10分钟，确保柱内无残留。
误区五：关机后未妥善保存柱子
新手关机后常忽略柱子保存细节，如未密封柱端、暴露在空气中，导致柱内溶剂挥发、微生物滋生(水相体系)。
规避建议：卸下柱子后，立即用堵头密封两端(避免用手触碰柱口)，存放于室温干燥处(避免阳光直射)；若长期不用，每月需用保存溶剂冲洗一次，防止柱内发霉或固定相干裂。
掌握以上规避方法，能有效延长凝胶色谱柱寿命，保障实验数据精准性，新手操作时需耐心细致，养成规范操作习惯。
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