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凝胶色谱柱-生物百科

更新时间:2023-12-11      点击次数:3868

  凝胶色谱柱是一种常用的分离技术,广泛应用于生物学、生物化学、药学、食品科学等多个领域。它的基本原理是通过凝胶颗粒来实现样品分离,凝胶颗粒根据其物理化学性质选择性地固定不同的化合物,从而实现样品的分离和纯化。

  常见的凝胶材料包括聚丙烯酰胺凝胶(Polyacrylamide Gel,简称PA)、琼脂糖凝胶(Agarose Gel)和硅胶凝胶(Silica Gel)。聚丙烯酰胺凝胶主要应用于蛋白质、多肽和核酸的分析和纯化,琼脂糖凝胶主要应用于大分子多糖、DNA片段的分析和纯化,硅胶凝胶主要应用于小分子化合物的分析和纯化。

  凝胶色谱柱的分离机理主要包括凝胶颗粒的吸附和分子筛效应。凝胶颗粒表面的功能基团能够与化合物发生作用,形成化学键,使其被固定在凝胶上。当样品通过凝胶色谱柱时,分子会根据其不同的分子大小、电荷、亲疏水性等物理化学性质在凝胶颗粒表面逗留时间不同,从而实现分离和纯化。

  常见分类:

  凝胶色谱柱有不同的形态,包括管柱、板柱和石英管柱等。

  管柱是一种常用的凝胶色谱柱,通常是由玻璃或塑料制成的管,内部填充着凝胶。

  板柱通常由平板材料制成,是一种较新的型号。

  石英管柱则是由石英材料制成的,因其化学和物理性质稳定,被广泛应用于高效液相色谱中。凝胶色谱柱还有不同的填充方式,包括前充式、后充式和包覆式等,不同的填充方式适用于不同的样品和分析条件。

  产品应用:

  凝胶色谱柱的应用非常广泛。在蛋白质分离和纯化中,凝胶色谱柱通常作为一种重要的步骤。例如,离子交换柱、尺寸排除柱、亲和层析柱和疏水柱等可以在不同的层次上对蛋白质进行分离和纯化。

  在核酸分析中,琼脂糖凝胶电泳是一种常用的技术,可用于分离不同长度的DNA片段。在药学中,凝胶色谱柱也被广泛应用于药物分析和检测,包括毒物检测、药物代谢动力学和药典标准化等。

  产品特点:

  (1)Supdex:高分辨率凝胶过滤层析,精细纯化

  Supdex30pg、Supdex75pg、Supdex 200 pg为新一代凝胶过滤介质,由葡聚糖与高交联度琼脂糖共价 结合而成,高交联度琼脂糖赋予了介质较高的耐压性,介质中分布的葡聚糖实现了其对不同大小蛋白和多肽的高度分离,能够实现高流速下高分辨率的精细分离纯化实验。

  (2)Pharose Fast Flow:大分子凝胶过滤

  Pharose系列生物分子纯化介质是基于高交联琼脂糖微球开发的传统生物分离介质,该产品保留了天然多糖 化合物**的亲水性及大网架结构,与生物活性大分子有很好的相容性,具有高载量,高适用性,无非特异性吸 附,快流速操作等特点,广泛用于病毒、蛋白质、核酸、多肽及多糖等的生物大分子实验室规模制备和生物制 药、生物工程的大工业化制备。

  (3)Bedex:经济快速脱盐/置换溶液

  Bedex系列是基于交联葡聚糖微球开发的凝胶过滤介质,该产品具有良好的化学稳定性和较高的分辨率,具 有多种分离范围和颗粒大小可供选择,广泛用于蛋白质的分离和蛋白质的脱盐/置换溶液。

  使用和维护:

  凝胶色谱柱的使用和维护也十分重要,以下是几点使用凝胶色谱柱的建议:

  1. 在使用之前,首先应当充分平衡凝胶颗粒,即将缓冲液流经凝胶时,缓冲液的pH值和离子强度可以随时间稳定下来。

  2. 样品中出现沉淀物时,应当采用化学清洗方法,而不是物理清洗方法,以避免柱体受损。

  3. 在保养凝胶色谱柱时,应当保证柱体充分干燥,并存储在合适的温度和湿度条件下,以保证其长期可靠使用。

  凝胶色谱柱是一种构建于化学、物理和生物学基础之上的高效分离和纯化技术。随着分析和纯化技术的不断发展和完善,它在科学研究和产业应用中的地位和作用也将不断得到提高。

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