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什么是凝胶渗透色谱柱

更新时间:2023-12-11      点击次数:1309

凝胶渗透色谱(Gel Filtration Chromatography)是一种基于凝胶颗粒孔径大小的分离技术,也称为分子排斥色谱(Size Exclusion Chromatography)。凝胶渗透色谱柱是用于进行此类分离的专门色谱柱。

凝胶渗透色谱柱是由一种或多种高分子材料制成的,如微球、基质颗粒等。这些高分子材料通常是交联的,并具有孔径分布的大小。这些孔径大小可以根据材料的制造方式进行调整。

样品在进入凝胶渗透色谱柱时,会与凝胶颗粒相互作用,样品大分子会被蓝色颗粒的微孔所隔离,无法进入颗粒内部,因此进一步阻止了大分子向内层移动的能力。而较小的分子则可以进入颗粒的内部,因此会相对快速地通过凝胶颗粒。这样,不同分子大小的样品可以在凝胶渗透色谱柱中分离出来。

凝胶渗透色谱柱的分离能力基于分子量分布的性质,因此特别适用于高分子化学和生物化学的分离和纯化。例如,它常用于分离和纯化蛋白质、DNA、RNA、糖类和多肽等高分子物质。其分离过程不依赖于分子的化学性质,可以分离富含分子的混合物,同时还可以用于精确分子量的确定。

需要注意的是,选择适合的凝胶渗透色谱柱时,应根据待分离物质的分子量范围选择适当的孔径大小。如果孔径过小,则不能分离大分子,如果孔径过大,则不能分离小分子。

TPChrom Beads凝胶渗透色谱填料的优势:
高度的粒径均一性,球形,反压低,洗脱体积小分离度大,分辨率高,装柱容易,线性流速大。

产品名称

粒径大小um

基质

交联度%

主要特点

分子排阻极限, Da

TPChrom  Beads X1

42

 

PS/DVB

1

溶胀能力强,较软,耐压低适用于中低压制备色谱

溶胀能力弱,较硬,耐压高

适用于中高压制备色谱

14000

TPChrom  Beads X3

3

1000-2000

TPChrom  Beads X8

8

400-1000

TPChrom  Beads X12

12

≤400


凝胶渗透色谱柱适用于有机溶剂体系半微量的高性能的SEC分析柱。由粒径均一,但每个填料上分布大小不同的孔,即由细孔多分散型均一粒径的填料装填而成。从而实现了校正曲线的优异的线形相关关系。
 
使用细孔多分散型分析柱获得的校正曲线没有变曲点。因而色谱图中的测定峰形不会出现不规则的凹凸现象可提供适用于分子量分布范围不同的三种规格分析柱。

GPC凝胶渗透色谱柱

GPC凝胶渗透色谱柱

凝胶渗透色谱柱的结构及主要功能:

由柱管、压帽、卡套(密封环)、筛板(滤片)、接头、螺丝(封头)与柱填料等组成。
(1)柱管:多用不锈钢制成,若果使用时柱压不高于70kg/cm2时,也可采用厚壁玻璃或石英管,管内壁要求有很高的光洁度。用于柱填料的装填。
(2)压帽:即色谱柱两端套合于柱管端外壁的塑性圆柱帽,中部有小孔,多为聚四氟乙烯制成,用于固定筛板。
(3)密封环:位于接头螺旋环内壁的弹性环,多为聚四氟乙烯制成,用于色谱柱两端压帽与柱外壁的密封。
(4)筛板:位于色谱柱两端紧贴柱管端的筛网状薄片,由烧结不锈钢或钛合金制成,孔径取决于填料粒度,一般为0.2~20&um。用于防止填料从柱管内漏出。
(5)接头:柱两端连接流动相与柱管的中空环套,由不锈钢制成。用于柱管路联通与柱端高压固定。
(6)封头:柱两端的密封螺丝,用于保存色谱柱时封头。
(7)柱填料:装填于柱管内的固定相担体,其直接决定了色谱柱的类型与用途,是色谱柱的核心。多为无定形或球形硅胶基质,也有环糊精、活性炭、聚苯乙烯-二乙烯基苯、聚甲基丙酸酯、氧化铝等基质。用于色谱分离。

凝胶渗透色谱柱是一种强大的高分子分离和纯化工具,可广泛应用于化学和生物学领域。 

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