经典的简易凝胶渗透色谱柱大多采用玻璃管作为柱管材料,一般玻璃柱管耐压是3000~4000kPa,不能承受更高的压力,无法满足凝胶渗透色谱柱的需要。
而不锈钢柱管的耐压可达几万kPa,甚至更高,所以玻璃柱管逐渐被不锈钢柱管取代。目前,GPC所用的柱子大部分采用不锈钢柱管,根据不同的色谱分离条件,来选择合适填料规格的色谱柱。
那么凝胶渗透色谱柱该如何进行选择呢?下面一起来看看吧
目前随着GPC技术的不断发展和更新换代,在一般的凝胶渗透色谱仪中,凝胶渗透色谱柱的长度多在150~600mm之间,柱内径约为2.1~30mm。过分长和粗的色谱柱在装柱过程中,对装柱技术的要求更高,想要装出既均匀又紧密而达到高效的色谱柱,难度较高。
实验室经常选用2~5根甚至更多根色谱柱串联起来使用,也可将同一型号的2根或2根以上的色谱柱串联使用,这样可以增加柱容量,扩展色谱柱的线性分离范围,得到高的分离效率。
比如技术人员为了要增加对低分子量部分的分离效率,可以通过增加装有小孔径凝胶的色谱柱数量来达到分离低分子量物质的目的。
实验要求凝胶渗透色谱柱的柱管内表面必须光滑平直,这样流动相在色谱柱内就不会形成沟流或死域,也就是说在该区域内,流动相可能停滞不前或因沟流使流速比柱中其他部分快,这些都会影响色谱柱的分离效率。
凝胶渗透色谱柱内径的大小也是影响分离效率的一个因素,初期的GPC经常使用2~5cm内径的粗柱,由于GPC技术发展不够成熟,导致分离效率低。
现在高效GPC通常使用2.1~8mm内径的不锈钢色谱柱。在制备型GPC仪中,所用的柱内径较大,一般在10~30mm之间。